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Diff Quick vs MGG : quand recourir à la coloration rapide en hématologie et en cytologie

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Les colorations Diff Quick et May-Grünwald-Giemsa (MGG) sont toutes deux des colorations de type Romanowsky utilisées en hématologie et en cytologie : comparez leur durée de coloration, la qualité morphologique obtenue et les cas dans lesquels il convient de privilégier l'une ou l'autre méthode.

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Dans les laboratoires d'hématologie et de cytologie, le choix de la méthode de coloration a une incidence directe sur le délai d'exécution. Les deux techniques les plus couramment utilisées pour l'évaluation morphologique des frottis sanguins et des préparations cytologiques sont la coloration de May-Grünwald-Giemsa (MGG), considérée comme la méthode de référence, et les colorations rapides de type Romanowsky (Diff Quick), conçues pour fournir un résultat en quelques minutes.

La technique de May-Grünwald-Giemsa comprend deux étapes successives : une coloration initiale au May-Grünwald (bleu de méthylène et éosinate dans du méthanol), suivie d’une coloration au Giemsa (mélange d’azur II, d’éosine et de bleu de méthylène). La procédure complète dure généralement entre 20 et 30 minutes, y compris les étapes de coloration, de lavage et de différenciation. Le résultat offre une excellente définition de la chromatine nucléaire et des granules cytoplasmiques, en particulier des granules basophiles, ce qui en fait le choix privilégié pour l’interprétation de cas complexes (suspicion de leucémie, détection de parasites, morphologie atypique).

La méthode Diff Quick (ou Diff-Quik®) est une coloration panoptique rapide de type Romanowsky qui reproduit le principe azure-éosine de la MGG, mais avec des réactifs prêts à l’emploi et des temps d’immersion nettement plus courts.
Le kit se compose de 3 solutions :
Fixateur (méthanol anhydre) : fixe les cellules sur la lame
Solution bleue (azure A/B dans un tampon phosphate pH 6,6) : colore les noyaux et les granules basophiles
Solution rouge (éosine Y dans un tampon phosphate pH 6,6) : colore le cytoplasme et les granules éosinophiles

La procédure type consiste à plonger la lame dans le fixateur pendant 30 à 60 secondes, puis dans la solution bleue et la solution rouge pendant 45 à 60 secondes chacune, avant de procéder à un bref rinçage à l'eau distillée. Le résultat est prêt pour l'observation au microscope en 2 à 3 minutes au total, contre 20 à 30 minutes pour la coloration MGG classique.

Quand choisir Diff-Quik

Les colorations rapides de type Romanowsky, telles que Diff-Quik, sont largement utilisées en hématologie et considérées comme adaptées à l’évaluation morphologique de routine des frottis sanguins périphériques.

Diff-Quik est particulièrement adapté aux situations suivantes :

Services d’urgence : différentiel leucocytaire rapide lorsque le délai d’exécution du MGG n’est pas compatible avec l’urgence clinique
Cytologie par ponction à l’aiguille fine (FNAB) : évaluation immédiate sur place de la qualité de l’échantillon
Cliniques et établissements ne disposant pas de laboratoire centralisé : résultats morphologiques obtenus dans des délais cliniquement utiles
La microbiologie : visualisation rapide des bactéries (bleu-violet) sur des frottis directs
Pour la prise en charge de cas complexes (suspicion de leucémie, parasitologie, morphologie atypique nécessitant une évaluation complémentaire), la coloration MGG classique reste préférable, car elle offre une meilleure définition des granules basophiles et de la chromatine.