Photométrie à fibre - Un guide de l'utilisateur ultime et un aperçu

Qu'est-ce que la photométrie des fibres ? Comment mettre en place une opération de photométrie fibre ? Comment choisir les accessoires de photométrie à fibre les plus performants ? Notre guide complet sur le système de photométrie à fibre peut vous d

Ce guide se compose de 4 chapitres qui sont organisés en fonction des différentes phases du parcours de la photométrie à fibre.

Le chapitre 1 présente les connaissances de base du système de photométrie à fibre.

Le chapitre 2 explique le principe de fonctionnement, les avantages et montre les étapes de mise en place de l'expérience correspondante.

Le chapitre 3 élabore les fonctions des différents modèles de photométrie de fibre et fournit des études de cas réussies pour montrer la gamme d'applications.

Le chapitre 4 donne des recommandations sur le choix des accessoires de photométrie à fibre les plus efficaces pour améliorer l'expérience dans la pratique.

Au cas où vous en sauriez peu sur la photométrie des fibres…

Le système de photométrie à fibre est une méthode d'imagerie optique qui permet aux chercheurs de détecter l'activité de grandes populations neuronales chez des animaux en mouvement libre pendant une longue période, ce qui aide à explorer la corrélation entre l'activité neuronale et les comportements des animaux.

Chapitre 1 : Guide d'apprentissage de la photométrie à fibre pour les débutants

Courte introduction:

La photométrie à fibre est une méthode optique basée sur le principe de mesure de la lumière émise par des molécules fluorescentes via une fibre optique basée sur le comptage de photons uniques corrélé dans le temps (TCSPC). De ce principe, on sait que la réalisation de cette expérience nécessite des outils de sonde pouvant exprimer la fluorescence dans le tissu, ainsi qu'un ensemble d'équipements pouvant transmettre la fluorescence et la détecter.

Ensuite, nous examinons d'abord les outils de fluorescence. Actuellement, les outils de fluorescence les plus couramment utilisés sont divisés en indicateurs de calcium, indicateurs de neurotransmetteurs, indicateurs de tension, etc. Parce qu'il existe de nombreux types de modèles animaux pour des applications expérimentales, et que nous devons également étudier des régions cérébrales spécifiques ou même des types de cellules spécifiques, les techniques d'édition de gènes ont été largement utilisées pour le développement de sondes.

Les indicateurs de calcium génétiquement codés (GECI) courants sont des protéines fluorescentes dérivées de la protéine fluorescente verte (GFP, etc.) et de ses variantes (par exemple, GFP, YFP, CFP, RFP, etc.) fusionnées à la calmoduline (CaM) et au M13 domaine de la chaîne légère de la myosine kinase. Lorsque Ca2+ est présent, il se lie à CaM, entraînant une interaction entre les domaines structurels M13 et CaM, déclenchant un réarrangement structurel de cpEGFP, qui améliore le signal de fluorescence vert/rouge.

Les GECI les plus largement utilisés sont : GCaMP, Pericams, Cameleons, TN-XXL et Twitch, parmi lesquels GCaMP6, GCaMP7 sont désormais largement utilisés dans les études d'imagerie calcique in vivo en raison de leur sensibilité supérieure. Ce qui suit est un résumé des types de GECI courants.

Chapitre 2 : En savoir plus sur la photométrie à fibre : principe de fonctionnement et processus

Par exemple, les avantages de la photométrie à fibre.

L'étude du système nerveux des animaux éveillés et en mouvement libre est un enjeu crucial de la recherche contemporaine en neurosciences. En détectant les signaux calciques associés à l'activité neuronale, nous sommes en mesure de mieux comprendre les circuits neuronaux complexes. Ces dernières années, les développements technologiques, notamment la microscopie à deux photons, la microscopie à photon unique et la photométrie à fibre, nous ont permis d'effectuer une détection en temps réel des changements dans les signaux calciques chez les animaux. L'application de ces techniques nécessite des protéines fluorescentes modifiées.