Application du cryostat comme équipement d'histologie dans les expériences immunohistochimiques

Un cryostat de qualité est l'équipement d'histologie clé pour réaliser des expériences immunohistochimiques très précises, conviviales et fluides.

Étapes pour la préparation des coupes dans les expériences immunohistochimiques

L'équipement d'histologie est essentiel dans les expériences d'immunohistochimie (IHC). Les 2 types courants de méthodes de sectionnement utilisées dans les expériences IHC sont la section de paraffine et la section congelée. Les étapes de la coupe en paraffine sont les suivantes : prélèvement d'un échantillon frais - déshydratation (fixation, déshydratation, clarification, infiltration de cire) - inclusion de paraffine - tranchage - coloration, montage - observation au microscope ; ce processus implique l'utilisation d'équipements d'histologie de base, notamment le déshydrateur, le composé OCT, la machine de coupe de paraffine, la machine de coloration, la machine de montage, le microscope, etc. Les étapes de la coupe congelée sont les suivantes : prélèvement d'un échantillon frais - enrobage congelé - tranchage - coloration (peut être effectuée manuellement) - observation au microscope. Pour ce processus de sectionnement, l'équipement d'histologie de base comprend un congélateur flash, une machine de sectionnement congelée et un microscope.

Problèmes courants des expériences immunohistochimiques (IHC)

Les exigences des expériences IHC dépendent des types d'échantillons, des antigènes et des méthodes de sectionnement. Pendant ce temps, la préparation de sections de paraffine dans les expériences IHC implique des étapes compliquées. Le prétraitement des tissus a des exigences élevées car certains antigènes peuvent être détruits à mi-chemin du processus, ce qui entraîne l'étape de récupération de l'antigène. L'étape de récupération peut être omise dans la coupe congelée car elle permet de mieux préserver l'immunocompétence des antigènes.

Si vous souhaitez ignorer l'étape de récupération des antigènes, auquel cas la coupe congelée deviendra la méthode de choix. Cependant, cela conduira facilement à la formation de cristaux de glace, infligeant un certain niveau de dommages aux structures cellulaires. De plus, les tranches préparées par coupe congelée sont plus épaisses que celles préparées par coupe à la paraffine, ce qui a un impact direct sur les résultats de coupe. Si la chambre du cryostat ne fournit pas une réfrigération suffisante, un congélateur flash sera utilisé pour soutenir le processus d'enrobage congelé. En même temps, il faut réfléchir à la manière de répondre aux besoins des techniciens de laboratoire subalternes afin de s'assurer que tout se passera bien au début de l'expérience. Dans ce cas, le coût des dépenses de fonctionnement du laboratoire pourrait être coûteux.

Avantages de l'utilisation du cryostat RWD pour la cryosection dans les expériences immunohistochimiques (IHC)

Résoudre le problème des tranches de tissus épais

1. La sortie de réfrigération du compresseur prend en charge la compensation de température deux fois à la fois ; Le contrôle de la température PID limite la fluctuation de la température dans la chambre dans une certaine plage et restaure automatiquement la température à un niveau normal.

2. Les roulements à rouleaux croisés haut de gamme, le moteur d'échantillonnage haute résolution à cinq phases, la broche très dense et la glissière d'injection rendent le système d'injection très précis.

3. Une fois que les critères ci-dessus sont satisfaits, un résultat de coupe idéal peut être obtenu sans régler l'épaisseur de coupe au maximum.

Réduire la pression causée par la formation de cristaux de glace

La formation de cristaux de glace est principalement attribuée à la vitesse de congélation lente dans l'enrobage congelé. Par conséquent, il est nécessaire que l'équipement soit capable de faire face à l'exigence de congélation instantanée. RWD Cryostat fournit une étape de congélation éclair qui peut atteindre -42 ℃ à son minimum, tandis que le point de congélation éclair peut même atteindre -60 ℃ à sa température la plus basse. Pendant ce temps, la chambre et la tête de l'échantillon effectuent la congélation séparément, réduisant ainsi la formation de cristaux de glace pour garantir la qualité des résultats de coupe.

Faible coût des dépenses opérationnelles

RWD Minux® FS800A possède 2 points de congélation flash semi-conducteurs et 15 points de congélation réguliers pour répondre aux applications qui impliquent d'énormes volumes de tâches. Pendant ce temps, l'efficacité de l'étape de congélation est alignée sur la norme internationale, produisant une fonction similaire à celle de l'enrobage congelé. Dans ce cas, le coût de l'enrobage congelé sera beaucoup plus faible sans l'utilisation d'un congélateur flash.

En même temps, il fournit un enregistrement de journal pour exécuter une rétrospective de section immédiate et efficace afin d'optimiser les critères de section et d'améliorer la qualité des résultats de section.

Sectionnement automatisé

Au début des expériences IHC, certains techniciens de laboratoire frais ne satisfont pas aux critères de sectionnement en raison de leur méconnaissance de l'utilisation du cryostat, et compromettent donc la qualité des résultats de section. En tenant compte de tous ces éléments, il fournit une fonction de découpage automatisé et permet aux utilisateurs de prédéfinir les critères de découpage. Avec la fonction de découpage automatisé, la qualité et la cohérence des résultats de section sont garanties. En attendant, la machine peut être mieux adaptée aux débutants en laboratoire pour assurer un démarrage très efficace des expériences.