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Comment améliorer le taux de réussite de la construction de modèles MCAO ?
Cet article vous présente la procédure et les points cruciaux qui vous aideront à améliorer votre taux de réussite.
(1) Fixez le rat anesthésié sur la table d'opération en position couchée. Rasez le site chirurgical et procédez à la désinfection. Utilisez les ciseaux ophtalmiques conventionnels ou le scalpel pour créer une incision au milieu du cou, puis utilisez une pince à épiler pour effectuer une dissection émoussée du tissu glandulaire et du fascia pour exposer et séparer CCA, ECA et ICA.
(2) Séparez l'ACI et l'artère ptérygopalatine correspondante. Utilisez la suture chirurgicale pour ligaturer l'artère ptérygopalatine avec un nœud coulant, ou serrez l'artère ptérygopalatine directement avec une pince vasculaire. Cette opération pourrait éviter l'insertion de suture dans l'artère ptérygopalatine, en s'assurant que l'ICA est la seule branche ouverte de l'ACC.
(3) Séparez le tronc de l'ECA et utilisez le stylo de coagulation électrique pour bloquer la branche de l'ECA. Ligaturez l'extrémité distale de l'ECA et coupez-la. Fixez le CCA et l'ICA avec des pinces artériolaires pour éviter les saignements avant de créer une incision en forme de "V" sur l'ECA à l'aide d'un ciseau ophtalmique. Insérez soigneusement la suture prétraitée avec la tête en silicone à travers l'ECA.
(4) Après avoir retiré la pince artériolaire ICA, insérez la suture dans le MCA pour atteindre l'extrémité, à une profondeur d'environ 17-18 mm (reportez-vous au schéma ci-dessous). Selon l'auteur, la profondeur estimée empiriquement dépend du poids de l'animal. Par exemple, pour des rats entre 260 g et 280 g, la profondeur d'insertion est d'environ 17 mm ; pour les rats de plus de 280 g, il est d'environ 18 mm. En bref, une légère résistance constitue un signal car elle indique que la suture pénètre juste dans l'artère cérébrale antérieure intracrânienne, bloquant l'ouverture de MCA.
(5) Utilisez le système d'imagerie laser speckle pour surveiller le flux sanguin du cortex cérébral après la chirurgie. Des diminutions de 70 % à 80 % du flux sanguin indiquent la réussite de l'établissement du modèle.
(6) Coudre le tissu sous-cutané et la peau après ligature et désinfection. Remettez le rat dans la cage après qu'il récupère de l'anesthésie.
(7) Ce n'est qu'en retirant la suture pour permettre à la tête en silicone de revenir à l'ECA que le flux sanguin du MCA peut être restauré, car le flux sanguin du CCA peut être reperfusé dans le MCA.
(8) Le modèle du groupe témoin suit presque la même procédure, la seule différence étant que la suture n'est pas insérée après la séparation des vaisseaux et que le tissu sous-cutané et la peau peuvent être cousus après ligature et désinfection.
Le modèle de souris MCAO est établi à peu près de la même manière que le modèle de rat. Au lieu de ligaturer l'artère ptérygopalatine, l'opérateur doit ajuster soigneusement l'angle pour éviter l'artère ptérygopalatine lors de l'insertion de la suture. Sélectionnez une suture appropriée en fonction du poids de l'animal et insérez-la dans l'ICA (10 ± 0,5) mm pour vous assurer que la suture est juste dans l'artère cérébrale antérieure intracrânienne et bloque l'ouverture de MCA.
Comment réduire la mortalité dans des modèles animaux d'ischémie cérébrale ?
Le président de la World Stroke Organization et ancien rédacteur en chef de Stroke déclare dans la mise à jour des recommandations précliniques de la table ronde de l'industrie de la thérapie de l'AVC que :
"Lorsque la sévérité de l'ischémie doit atteindre un certain seuil d'inclusion (par exemple une diminution prédéfinie de la perfusion détectée par débitmétrie laser Doppler, ou le développement d'une atteinte neurologique d'une sévérité donnée), cela doit être clairement indiqué. Habituellement, ces critères doit être appliqué avant l'attribution aux groupes expérimentaux. Si une taille de lésion prédéfinie est requise pour l'inclusion, celle-ci doit être détaillée, ainsi que les critères d'exclusion correspondants.
L'AVC ischémique focal chez les animaux est typiquement induit par l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne. Cependant, les modèles d'occlusion de l'artère cérébrale moyenne, y compris les méthodes de suture et emboliques, sont imparfaits pour provoquer une réduction soutenue du flux sanguin. Il est possible dans certaines situations qu'une occlusion se produise mais qu'une reperfusion spontanée puisse s'ensuivre, entraînant une variabilité de la taille de l'infarctus. Les paramètres physiologiques de base tels que la pression artérielle, la température, les gaz sanguins et la glycémie doivent être surveillés régulièrement. La température doit être maintenue dans la plage physiologique normale. Il est important de surveiller le débit sanguin cérébral à l'aide d'un flux Doppler ou d'une imagerie de perfusion pour documenter une occlusion soutenue adéquate et pour surveiller la reperfusion dans des modèles d'ischémie temporaire."[1]
Les références
[1]Fisher M, et al. AVC, 2009