Précautions d'utilisation d'un microtome rotatif pendant le rognage, la coupe et le montage

La coupe en paraffine est la technique la plus utilisée en histopathologie.

Son protocole peut être compliqué et tout manquement à une étape peut affecter la qualité de la coupe. Dans l'article précédent, nous avons discuté du dépannage et des conseils courants de sectionnement des tissus au microtome. Dans ce numéro, nous examinerons de plus près les précautions à prendre lors de l'utilisation d'un microtome à paraffine, du rognage, du tranchage au montage, et parlerons de l'un des points les plus douloureux - les sections épaisses et minces alternées.

1 Parage

Le rognage se fait normalement à une épaisseur de 20-30 µm.

Recommander de couper le tissu à l'épaisseur de 20-30 µm.

Pour les tissus plus durs ou les tissus plus petits, il doit être plus fin. Une coupe standard est terminée lorsque l'ensemble du tissu est exposé.

2 Sectionnement

La lame du microtome de qualité doit être tranchante et sans encoches, et régulièrement remplacée. Cela peut compenser les ratés du processus de prétraitement.

Avant la coupe : serrer la pince à couteau, le porte-couteau et le porte-bloc d'échantillon, et tailler la tranche jusqu'à ce que le tissu soit complètement exposé.

Pendant la coupe : le volant doit être tourné à une vitesse uniforme. s'il est trop rapide, il en résultera une épaisseur inégale des coupes (slice jumping), usant le porte-couteau ; s'il est trop lent, il épaissira les coupes. L'épaisseur de coupe est généralement fixée à 3 ~ 5 μm. Une section standard doit garder le tissu intégral et uniforme avec une épaisseur uniforme. Les coupes de tissus incomplètes peuvent entraîner des erreurs de diagnostic et des omissions.

Conseils : La direction du tissu étant intégré. Les couches du tissu, la direction de ses fibres, muscles, etc. doivent être parallèles au couteau. Les parties difficiles à couper doivent être placées sur le dessus lors de l'enrobage, telles que l'épiderme de la peau, l'enveloppe de la masse et la séreuse du tractus gastro-intestinal pour minimiser la rupture des coupes de tissus. Après avoir découpé les tranches requises, les tranches seront retirées avec une pince et placées dans le bain-marie ou étalées sur la machine à cuire.

Rappel:

Le microtome doit être vérifié pour son bon fonctionnement avant la coupe. Pour les tissus durs tels que les tissus décalcifiés, la moelle osseuse, les fibromes utérins et les tissus calcifiés, le même bord de lame doit être utilisé dans la mesure du possible afin de réduire les risques d'endommagement de la lame.

Lors de l'étalement des sections ou du nettoyage, la brosse doit aller vers le haut, car le fait de descendre peut facilement couper les fils de la brosse par la lame, ce qui endommagera la lame.

3 Montage

Mettre les coupes au bain-marie pour les aplatir et les lisser. Si les sections sont encore froissées, ajoutez une solution d'alcool à l'eau car elle abaisse la tension superficielle et élimine les rides.

La tranche de haute qualité est prélevée et montée sur la glissière à son emplacement 1/3 à partir de l'un de ses côtés. La lame sera étiquetée pour identification. La température générale de l'eau pour flotter les tranches est d'environ 40 ℃.

4 Alterner les coupes épaisses et fines

Il peut être pris pour acquis que si l'épaisseur de la section est réglée sur la machine, les tranches sortiront à l'épaisseur souhaitée et doivent avoir l'épaisseur souhaitée, sinon la machine doit être imprécise. Cependant, plusieurs autres facteurs peuvent provoquer une alternance de sections épaisses et minces.

Par exemple, le bord de la lame n'est pas tranchant ou la vitesse de coupe n'est pas uniforme - une coupe lente donne des tranches plus épaisses. Seule une lame tranchante avec une course de coupe uniforme peut garantir une coupe d'épaisseur uniforme.

De plus, la température ambiante peut également provoquer un échauffement du bloc de cire, rendant les sections plus épaisses. En bref, des coupes épaisses et minces alternées doivent être analysées en fonction de la situation réelle.

Le microtome rotatif RWD Minux® S710 peut résoudre efficacement le problème d'épaisseur anormale et assurer la qualité de la coupe.

La caractéristique unique combine la coupe manuelle et la configuration semi-automatisée, assurant la précision de la coupe du microtome, répondant aux diverses habitudes de la plupart des opérateurs. Il réduit l'apparition de sauts de tranches lors de la coupe des tissus durs et assure l'exhaustivité et la continuité des coupes. De plus, il offre une maintenance à faible coût.