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Après avoir lu cet article, ne dites pas que vous ne connaissez pas la technologie PCR
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Après avoir lu cet article, ne dites pas que vous ne connaissez pas la technologie PCR
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Après avoir lu cet article, ne dites pas que vous ne connaissez pas la technologie PCR
I. Qu'est-ce que la PCR ?
La PCR, abréviation de Polymerase Chain Reaction (réaction en chaîne par polymérase), est une méthode d'amplification de quelques copies ou dizaines de copies d'ADN à des millions de copies, et c'est l'une des technologies les plus importantes à ce jour. La PCR a été largement utilisée dans les tests de paternité et les enquêtes criminelles.
La PCR peut être considérée comme une technique similaire au processus de réplication de l'ADN qui se produit dans les cellules et qui aboutit à la production de nouveaux fragments d'ADN complémentaires en utilisant l'ADN original comme modèle. La réplication de l'ADN dans les cellules est un processus très complexe. Une variété de facteurs sont impliqués dans la réplication. La PCR est une réaction de réplication de l'ADN réalisée dans un tube à essai. Le principe de base est similaire à la réplication de l'ADN intracellulaire, mais le système de réaction est relativement simple.
II. Principe de base de la PCR
Le principe de base de la PCR est de prendre l'ADN à amplifier comme matrice, d'utiliser une paire de fragments oligonucléotidiques complémentaires aux extrémités 5′ et 3′ de la matrice comme amorces, sous l'action de l'ADN polymérase s'étendre le long du brin de la matrice selon le mécanisme de réplication semi-conservée jusqu'à l'achèvement de la synthèse du nouvel ADN, et de répéter ce processus pour rendre le fragment d'ADN cible amplifié.
III. Etapes de base de la PCR
① Dénaturation : Chauffer le système réactionnel à 95°C pour dénaturer tout l'ADN matrice en ADN simple brin
② Recuit : Diminuez la température à la température appropriée pour recuire les amorces à l'ADN matrice
③ Extension : Augmenter la température à 72°C et l'ADN polymérase catalyse la réaction de synthèse de l'ADN avec le substrat dNTP.
Les trois étapes ci-dessus sont appelées un cycle, et un tel cycle est répété 25 à 30 fois pour obtenir une grande quantité d'ADN cible.