Pourquoi la qPCR est-elle utilisée pour les tests COVID-19 dans le monde ?

Quels sont ses atouts techniques ?

Avec la routinisation des tests COVID-19, la qPCR, une technologie de pointe dans le diagnostic moléculaire, est progressivement devenue universelle. Cette technologie présente de nombreux avantages techniques par rapport à la PCR traditionnelle, ce qui en fait la référence pour les tests COVID-19 dans le monde. Quels sont les avantages de la qPCR qui la rendent universellement disponible et maintiennent son excellente fiabilité ?

Avantages de la qPCR

1. Faible risque : le couvercle n'est ouvert que deux fois dans l'ensemble du processus, de sorte que le risque de contamination du laboratoire est faible ;

2. Opération simple : l'opération est plus simple par rapport aux étapes d'opération fastidieuses de mNGS, ce qui facilite sa promotion ;

3. Rapide : l'ADN amplifié est détecté pendant que la réaction qPCR est en cours, il n'a donc pas besoin d'être détecté séparément (par exemple sur sépharose) comme dans la PCR traditionnelle ;

4. Haute efficacité : la qPCR est considérée comme une méthode très efficace et, en conjonction avec des postes de travail automatisés pour le traitement des liquides, elle peut traiter un grand nombre d'échantillons en peu de temps ;

5. Haute sensibilité : la qPCR est capable de discriminer une différence de 2 fois dans le nombre d'ADN cible, et elle peut détecter aussi peu que quelques-unes des molécules d'ADN initiales. Le QPCR n'a besoin que de 1/1000e du montant par rapport au PCR ;

6. Large gamme de quantification : il peut quantifier une large gamme sur plusieurs ordres de grandeur ;

7. Reproductibilité : elle est généralement considérée comme hautement reproductible.

Applications de la qPCR

De nombreuses personnes peuvent avoir une compréhension de base de la qPCR uniquement grâce aux tests COVID-19, mais son application ne peut en fait pas se limiter aux tests COVID-19. En raison des avantages techniques évidents, la qPCR a un large éventail d'applications. La qPCR ayant une histoire assez longue, diverses études ont prouvé sa fiabilité et sa stabilité. De même, les fabricants de cycleurs qPCR ont développé des plates-formes de support et les fournisseurs d'équipements automatisés de manipulation de liquides ont développé des solutions automatisées compatibles avec la qPCR.

Le plus souvent, la qPCR est utilisée dans le diagnostic moléculaire, où elle remplace lentement les méthodes traditionnelles (images microscopiques). Il est utilisé pour détecter, identifier et quantifier les micro-organismes (bactéries, virus et champignons) qui causent des maladies. Avec qPCR, le travail manuel est réduit. Il permet le traitement d'un grand nombre d'échantillons en peu de temps (jusqu'à 384 voire 1536 réactions par run) et constitue une méthode irremplaçable dans les laboratoires de diagnostic. Il faut cependant noter que la méthode ne détecte que la présence d'ADN ou d'ARN de micro-organismes, pas leur viabilité. Par conséquent, les techniques microbiologiques traditionnelles sont encore parfois nécessaires en conjonction avec la PCR. En outre, un autre domaine d'application très important de la qPCR concerne les études d'expression génique, qui peuvent nous aider à comprendre divers domaines de la biologie, de la microbiologie, de la médecine et d'autres sciences de la vie.