Étude sur la détection génétique des échantillons d'hydrothorax, d'ascite et de surnageant

L'épanchement pleural malin (EMP), également connu sous le nom d'épanchement pleural, est un épanchement pleural causé par la métastase de tumeurs malignes provenant de la plèvre ou d'autres tumeurs malignes impliquant la plèvre.

Arrière-plan

L'épanchement pleural malin (EMP), également connu sous le nom d'épanchement pleural, est un épanchement pleural causé par la métastase de tumeurs malignes provenant de la plèvre ou d'autres tumeurs malignes impliquant la plèvre. Presque toutes les tumeurs malignes peuvent envahir la plèvre et produire une EMP, qui est plus fréquente dans le cancer du poumon, le cancer du sein, le cancer gastro-intestinal et d'autres cancers[1].

Les cellules malignes dans l'épanchement pleural et/ou le tissu pleural sont le "gold standard" pour le diagnostic de l'EMP. L'étude a rapporté que la sensibilité de la cytologie de l'épanchement pleural dans le diagnostic de l'EMP était de 60,0 % (40,0 % ~ 87,0 %) [2,3]. Ses performances diagnostiques dépendent de la localisation de la tumeur. S'il est situé à la surface des cellules mésothéliales pleurales, les cellules malignes tombent facilement et pénètrent dans l'épanchement pleural. Seules quelques cellules malignes tombent dans l'espace pleural lorsqu'elles sont situées au niveau ou en dessous de la couche séreuse. La quantité minimale de liquide requise pour l'examen cytopathologique est encore controversée. On considère généralement que 20 ~ 50 ml suffisent. Cependant, il est rapporté dans la littérature que la quantité de liquide soumise à l'examen> 75 ml peut améliorer le taux de diagnostic de MPE [4].

Étude d'échantillons de cellules de liquide pleural dans la détection de gènes

1. En 2019, l'étude [5] du Peking University Cancer Hospital a recueilli rétrospectivement 295 échantillons d'EMP de patients atteints d'adénocarcinome pulmonaire. 92 patients avaient des échantillons de tissus et de plasma appariés, et 248 patients avaient des échantillons de plasma. La cohérence entre la détection des cellules d'épanchement pleural malin et la détection tissulaire était de 87,1 %. La sensibilité et la spécificité de la détection de la mutation EGFR des cellules d'épanchement pleural étaient de 71,4 % et 96,5 %, ce qui pourrait mieux refléter la mutation EGFR du tissu tumoral et guider efficacement le traitement ciblé des patients.

Comparaison des résultats de détection des mutations EGFR entre le MPE et les tissus

2.Le consensus d'experts sur la détection de la mutation du gène EGFR T790M chez les patients chinois atteints d'un cancer du poumon non à petites cellules[6] souligne que lorsque les tissus ne peuvent pas être obtenus, d'autres échantillons tels que des échantillons de cytologie tumorale ou des échantillons de plasma peuvent être pris en compte pour l'EGFR T790M détection (Catégorie 2A).

Détection génétique d'échantillons de surnageant d'épanchement pleural

1. Une étude [7] a inclus 63 patients atteints d'un cancer du poumon métastatique (n = 30, cohorte 1) ou sans tissu tumoral correspondant (n = 33, cohorte 2). Des échantillons d'EP et de plasma ont été prélevés chez chaque patient en même temps. Le surnageant et le sédiment cellulaire de PE ont été traités respectivement pour extraire le cfDNA (PE cfDNA) et l'ADN de sédiment (sDNA). Les résultats ont montré que 98,4 % (62/63) des échantillons de cfDNA PE chez tous les patients présentaient des modifications somatiques détectables, tandis que 90,5 % (57/63) du sDNA PE et 87 % (55/63) du cfDNA plasmatique. C'est-à-dire que la teneur en ADNct dans le surnageant d'épanchement pleural est beaucoup plus élevée que celle des cellules de sédiment d'épanchement pleural, et a un taux de détection de mutation plus élevé et une abondance de détection de mutation plus élevée : surnageant d'épanchement pleural (98,4 %) > cellules d'épanchement pleural ( 90,5 %).

Détection des variations de tous les patients

2. Une autre étude [8] a utilisé la méthode de séquençage de deuxième génération (NGS) pour détecter la mutation génétique dans le surnageant du liquide pleural de patients atteints d'adénocarcinome pulmonaire (n = 150). Les 150 échantillons ont obtenu suffisamment d'ADN et 104 (90 %) des 116 échantillons ont été testés avec succès pour NGS. Des mutations somatiques ont été détectées dans 82 % des échantillons et des mutations cliniquement pertinentes ont été trouvées chez 50 % des patients. La comparaison des mutations motrices opérables détectées dans les échantillons de surnageant et de plasma a montré une cohérence de 84 %.

Conclusion : La détection génétique moléculaire du surnageant d'épanchement pleural facilite la détection génétique de routine. Il est très riche en ADN tumoral frais, qui peut fournir des échantillons précieux pour la détection des gènes du cancer du poumon. Surtout pour les patients dont le tissu tumoral est insuffisant, cela peut réduire le taux d'échec de la détection des gènes, raccourcir le cycle de détection et éviter les biopsies répétées.

Chevauchement des mutations motrices opérables cliniquement pertinentes détectées entre les échantillons de surnageant de FNA et la détection de biopsie liquide de cfDNA plasmatique correspondante

Soumission d'échantillon pour inspection

Pour la soumission d'échantillons, l'épanchement pleural est stocké dans un tube à centrifuger de 50 ml, 30 à 50 ml pour le projet multigène tumoral, 15 à 20 ml pour le projet EGFR et transporté à basse température.

Dans la recommandation 6 du Chinese Expert Consensus[9]sur le diagnostic de l'épanchement pleural, il est souligné que pour le cancer du poumon non à petites cellules avec MPE, des échantillons de tissu tumoral ou des échantillons de masse cellulaire de sédiment d'épanchement pleural peuvent être sélectionnés pour la détection.

Bien que les échantillons d'hydrothorax jouent une performance de détection très cohérente avec les échantillons de tissus dans la détection des gènes tumoraux. Cependant, il est indéniable que le taux de détection des échantillons chirurgicaux ou de ponction au site de la tumeur est meilleur que celui des cellules d'épanchement pleural ou des échantillons de surnageant. Par conséquent, dans En termes de sélection d'échantillons, le consensus d'experts chinois sur l'application clinique de la technologie de séquençage de deuxième génération dans le NSCLC recommande toujours que les tests génétiques des patients atteints de tumeurs soient le premier choix pour les tests tissulaires. En cas de prélèvements tissulaires insuffisants ou de tissus inaccessibles, la biopsie liquide peut être choisie comme moyen complémentaire[10].

Points clés du consensus des experts chinois sur l'application clinique de la technologie de séquençage de deuxième génération dans le NSCLC

Pour les projets liés au cancer du poumon biologique de Feishuo, tels que le kit de détection des mutations génétiques humaines EGFR/KRAS/BRAF/HER2/ALK/ROS1 (GXZZ 20203400094) et le kit de détection des mutations génétiques humaines EGFR (GXZZ 20193400366), l'extraction de l'épanchement pleural et les échantillons de cellules de précipitation peuvent être utilisé pour la détection. Pour plus de détails, veuillez contacter pour discuter des questions de coopération.

Référence:

[1]Médecine (Kaunas). 15 août 2019;55(8):490.

[2]DOI : 10.1136/thx.2010.136978.

[3]Can Respir J, 2020, 2020 : 2950751.

[4] Cancer Cytopathol, 2014, 122(9) : 657‐665.

[5]Cancer du poumon. 2019 septembre;135:116-122.

[6]Consensus d'experts sur la détection de la mutation du gène EGFR T790M chez les patients chinois atteints d'un cancer du poumon non à petites cellules

[7]Théranostique 2019 ; 9(19): 5532-5541.

[8]Annales d'oncologie 30 : 963–969, 2019

[9] Consensus d'experts chinois sur le diagnostic de l'épanchement pleural

[10]Consensus d'experts chinois sur l'application clinique de la technologie de séquençage de deuxième génération dans le NSCLC (version 2020)